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      看圖例了解二手液質聯用儀檢測流程

      作者: 來源: 時間:2022-06-14
      液質聯用儀是將液相色譜儀與質譜儀聯用的儀器,用于樣品定性定量分析。其特點是將應用范圍非常廣的液相色譜分離方法與靈敏、專屬、能提供分子量和結構信息的質譜法結合起來的一種現代分析技術。

      如今蛋白組/代謝組學被廣泛應用于生命科學領域,液相色譜串聯質譜技術(液質聯用)是蛋白組/代謝組學研究的主要手段,因此液質聯用受到了醫學科學們非常大的重視。


      液質聯用儀是將液相色譜儀與質譜儀聯用的儀器,用于樣品定性定量分析。其特點是將應用范圍非常廣的液相色譜分離方法與靈敏、專屬、能提供分子量和結構信息的質譜法結合起來的一種現代分析技術。


      二手液質聯用儀技術原理:


      樣品通過液相色譜分離后的各個組分依次進入質譜檢測器,各組分在離子源被離子化,產生帶有一定電荷、質量數不同的離子。不同離子在電磁場中的運動行為不同,采用質量分析器按不同質荷比(m/z)把離子分開,得到依質荷比順序排列的質譜圖。通過對質譜圖的分析處理,可以得到樣品的定性和定量結果。


      液相色譜分析的一般流程圖解

      液相色譜分析的一般流程圖解


      液相色譜部分由進樣系統、輸液系統、分離系統三個部分組成


      (1)進樣裝置要求密封性好,死體積小,重復性好,中心進樣,進樣時對色譜系統的壓力、流量影響小。


      (2)輸液系統主要的是梯度洗脫裝置——有兩種方式:一種稱低壓梯度,指常壓下溶劑按一定比例混合后再由高壓泵輸入色譜柱,又稱外梯度;另一種稱高壓梯度,指先用高壓泵將各溶劑輸入混合器混合,再送入色譜柱,也稱為內梯度。


      (3)分離系統包括色譜柱、連接管和恒溫器等。與單純LC相比,LC-MS一般流速較低(高流速可能影響霧化效果),所以一般用窄徑柱,即2 mm或2.1mm的,粒徑一般為3.5μm,也有1.7μm的。


      質譜的電離與質量分析流程圖解

      質譜的電離與質量分析流程圖解


      (1)ESI電離:其工作原理是將液滴變成蒸汽,產生離子發射的過程中形成的溶劑由液相泵輸送到ESI Probe,經其內的不銹鋼毛細管流出,這時給毛細管加2-4 kv的高壓,由于高壓和霧化氣的作用,流動相從毛細管頂端流出時,會形成扇狀噴霧,使液滴生成含樣品和溶劑離子的氣溶膠。ESI屬于zui軟的電離方式,通常只產生分子離子峰。適合熱不穩定的極性分子,能分析小分子及大分子。


      (2)四極桿質量分析器:四極桿內所包圍的空間存在雙曲線形電場。從離子源入射的加速離子穿過四極桿中的電場會受到電場作用,只有選定的m/z離子以限定的頻率穩定的通過四極桿質量分析器,其他離子則碰到極桿上被吸濾掉,不能通過,即達到“濾質”的作用。四極桿質量分析器結構緊湊,體積小,掃描速度快,適用于LC-MS聯用儀。


      二手液質聯用儀檢測流程總結


      所謂液相色譜串聯質譜實驗,就是通過液相色譜把要分析的混合物分離開,再用質譜對某個或某些分子進行定性或定量。它的強大功能使之不僅能輕松面對單個分子的研究,更加適合針對于復雜樣本的“組學”分析。由于蛋白質和小分子性質的差異,面向蛋白組學和代謝組學的液質聯用系統也有所區別,我們將在后續的篇幅中介紹液質聯用系統在各類學研究中的應用,敬請期待。


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